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從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

發(fā)布時(shí)間:2014-2-22 12:29:33??????瀏覽次數(shù):

從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

產(chǎn)品在線:http://aryngbeck.com/Product/8051642613.html

1.?dāng)?shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA

2.即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好

3.少量起始樣本,RNA產(chǎn)量穩(wěn)定

4.無需酚/ 氯仿抽提,無需氯化銫梯度離心,無氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA,硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本,使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織。可在QIAcube全自動核酸純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本,可使用RNeasy Micro Kit(離心柱結(jié)合能力為45 μg RNA)、RNeasy Midi Kit(離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA)。

詳細(xì)信息:

性能

RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動物或人類組織樣本,或從100–1 x 107個(gè)動物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA。

RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產(chǎn)量

樣本來源

起始材料

平均產(chǎn)量(μg

動物細(xì)胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴細(xì)胞(未受激)


1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106


12
15
35
0.5

小鼠組織



10 mg
10 mg
10 mg


40
10
35

真菌細(xì)胞
S. cerevisiae


1 x 107


25


原理

RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度,簡化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA,并且DNA殘留水平達(dá)到最低。

操作流程

RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個(gè)動物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動物或人類組織中或小于5 x 107個(gè)酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結(jié)合到膜上(最多可結(jié)合100 μg),污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用,可在RNeasy操作過程中進(jìn)行柱上DNA酶處理,去除DNA殘留。之后可在30–100 μl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方案可供選擇。


應(yīng)用

使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1(10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中),適用于多種下游應(yīng)用,包括:

1.Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡

2.終點(diǎn)式RT-PCR

3.定量real-time RT-PCR

4.芯片分析

5.Poly A+ RNA篩選

技術(shù)參數(shù):

特點(diǎn)

參數(shù)

Applications

PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

Elution volume

30–100 μl

Format

Spin column

Main sample type

Tissue, cells

Processing

Manual (centrifugation)

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

Total RNA

Sample amount

0.5–30 mg

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes

Yield

Varies


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