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純化基因組DNA、線粒體DNA、細菌、寄生蟲或病毒DNA

發(fā)布時間:2014-2-22 12:27:03??????瀏覽次數(shù):

1.快速純化高品質,即用型DNA

2.重復性好,產量高

3.徹底去除污染物和抑制劑

QIAamp DNA Mini Kit使用硅膠膜技術從組織、拭子、CSF、血液、體液或尿液細胞中純化核酸。組織用酶裂解,離心柱分離過程無需機械勻漿操作,手動操作時間僅為20分鐘。QIAamp DNA Mini Kit可在QIAcube全自動核酸純化儀上自動純化DNA。

詳細信息:

性能

QIAamp DNA Mini Kit可純化長達50 kb的DNA片段。這個長度的DNA可完全降解且有最高的擴增效率。獲得的核酸或DNA的量取決于樣本來源(見表)。

QIAamp樣本制備技術是完全經過驗證的,純化所得核酸可用于任何分子實驗或其他下游應用,而無侵犯專利的風險。

QIAamp DNA Mini Kit的產量

樣品

用量

總核酸的量(μg*

DNA 的量(μg?

血液

200 μl

4–12

4–12

白膜層

200 μl

25–50

25–50

細胞

106

20–30

15–20

肝臟

25 mg

60–115

10–30

大腦

25 mg

35–60

15–30

25 mg

25–45

5–10

心臟

25 mg

15–40

5–10

腎臟

25 mg

40–85

15–30

脾臟

10 mg

25–45

5–30

* 核酸未經RNase處理 。
? 核酸經RNase處理??偤怂岬牧浚é蘥)*

 

 

 

原理

QIAamp DNA Mini Kit采用快速離心柱或真空操作,簡化了從人類組織樣本中純化DNA的過程。無需苯酚-氯仿抽提。DNA特異性結合到QIAamp硅膠膜上,污染物流走。PCR抑制劑,如:二價陽離子和蛋白,可通過兩步有效的洗滌被去除,結合在離心柱上的純DNA可用水或試劑盒中的緩沖液洗脫。QIAamp DNA技術從人組織樣本中純化得到的基因組、線粒體、細菌、寄生蟲或病毒DNA,可用于PCR和印跡實驗中。 

操作流程

試劑盒含有優(yōu)化的緩沖液,能有效裂解樣本,可穩(wěn)定核酸,并促進DNA選擇性結合到QIAamp硅膠膜上。將乙醇加入到裂解物中,并上樣到QIAamp離心柱上。洗滌緩沖液用于去除雜質,高純的即用型DNA可用水或低鹽緩沖液洗脫。

組織用酶裂解,無需機械勻質化操作,方便的離心柱過程只需20分鐘的手工操作時間(裂解時間取決于樣品來源)。樣品可用離心處理,或已處理過的血液或其他體液可用QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S真空底座處理。此外,嚴密的裂解過程使得QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從細菌或寄生物中純化基因組DNA。在QIAcube全自動核酸純化儀上純化基因組DNA用以減少手動操作時間。

真空處理

可用真空裝置替代離心機處理血液或體液,可更快更方便地進行DNA純化。QIAamp Mini離心柱可在QIAvac 24 Plus真空底座上配合VacValves和VacConnectors使用。在樣本流速顯著不同時,需使用VacValves以確保一致的真空條件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。使用VacConnectors,也可使QIAamp離心柱操作在帶有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上進行。 

應用

QIAamp DNA Mini Kit非常適合于從常規(guī)人組織樣本中純化DNA,包括:肌肉、肝臟、心臟、大腦、骨髓和其他組織、拭子(口腔、眼睛、鼻子、咽喉和其他)、CSF、血液、體液和尿液細胞。DNA可在20分鐘內從多達25 mg的組織或200 μl的液體中純化,洗脫體積50–200 μl。

技術參數(shù):

特點

參數(shù)

Applications

PCR, Southern blotting

Elution volume

50–200 μl

Format

Spin column

Main sample type

Whole blood, tissue, cells

Processing

Manual (centrifugation or vacuum)

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

Genomic DNA, mitochondrial DNA, bacterial DNA, parasite DNA, viral DNA

Sample amount

200 μl/25 mg/5 x 10e6

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes

Yield

4–12 μg


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