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質(zhì)粒中提試劑盒QIAGEN Plasmid Midi Kit

發(fā)布時間:2014-2-22 12:35:08??????瀏覽次數(shù):

純化至多100 μg轉(zhuǎn)染級質(zhì)?;蚩滤官|(zhì)粒DNA

1.純化得到相當于2次CsCl梯度離心得到的DNA純度

2.高產(chǎn)量質(zhì)粒DNA

3.經(jīng)濟的制備方法

4.使用LyseBlue,獲得最佳的裂解效果和最大的DNA產(chǎn)量

QIAGEN Plasmid Kits通過重力流陰離子交換柱純化轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。該試劑盒可純化獲得至多100 μg質(zhì)粒DNA。離心獲得澄清的裂解產(chǎn)物和異丙醇沉淀。

詳細信息:

性能

QIAGEN Plasmid Midi Kits利用重力流QIAGEN-tip 100陰離子交換柱高效純化質(zhì)粒DNA。只需25–100 ml培養(yǎng)基,即可純化獲得多達100 μg的高拷貝質(zhì)粒DNA。(培養(yǎng)容量取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:轉(zhuǎn)染、克隆、測序和體外轉(zhuǎn)錄。


原理

QIAGEN-tips內(nèi)獨特的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計。它獨特的分離特性,使純化的DNA的純度相當于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動操作時間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免使用苯酚、氯仿、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對使用者和環(huán)境的危害。

操作流程

使用QIAGEN Plasmid Kits,細菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質(zhì)粒DNA在適當?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA。純化得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,通過離心收集。

應(yīng)用

QIAGEN Plasmid Kits純化得到的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:

1.轉(zhuǎn)染

2.克隆

3.PCR

4.體外轉(zhuǎn)錄

技術(shù)參數(shù):

特點

參數(shù)

Applications

Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc.

Culture volume/starting material

25–100 ml culture volume

Plasmid type

High-copy, low-copy, cosmid DNA

Processing

Manual (centrifugation)

Samples per run; throughput

1 sample per run

Technology

Anion-exchange technology

Time per run or prep per run

150 min

Yield

<100 μg


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